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標(biāo)簽:總皂苷(Saponin?)含量試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
總皂苷(Saponin?)含量試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63331 |
皂苷(Saponin)是苷元為三萜或螺旋甾烷類(lèi)化合物的一類(lèi)糖苷,主要分布于陸地高等植物中,也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等有價(jià)值的生物活性。
測(cè)定原理:
使用超聲波提取樣品中的皂苷,利用香草醛-高氯酸顯色體系測(cè)定總皂苷含量。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、烘箱、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、高氯酸、乙酸、超聲清洗器
試劑的組成和配制:
提取液:液體 50ml×1瓶,4℃保存;
試劑一:12ml×1瓶,4℃保存;
試劑二:高氯酸,自備;
試劑三:乙酸,自備。
總皂苷提取:
樣本烘干,粉碎過(guò)篩,稱(chēng)取0.05g,加入1mL提取液,超聲提取1h;8000g,25℃離心10min,取上清待測(cè)。
測(cè)定步驟
1、可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至589nm,蒸餾水調(diào)零。
2、測(cè)定管:取0.5mL上清,70℃揮發(fā)至干。加入0.2mL試劑一和0.8mL試劑二,55℃水浴20min。吸取200μL加入1mL玻璃比色皿中,再加入1000μL試劑三,充分混勻后,589nm下測(cè)定吸光度A1。
3、空白管:取0.5mL提取液,70℃揮發(fā)至干。加入0.2mL試劑一和0.8mL試劑二,55℃水浴20min。吸取200μL加入1mL玻璃比色皿中,再加入1000μL試劑三,充分混勻后,589nm下測(cè)定吸光度A2。計(jì)算△A= A1-A2。
總皂苷含量計(jì)算:
1.以齊墩果酸為對(duì)照品計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線(xiàn)為:y = 0.0072x - 0.012,R2 = 0.9968,x為對(duì)照品濃度,μg/mL,y為吸光度△A。
總皂苷含量(μg/g干重)=(△A+0.012)÷ 0.0072×V樣÷(V樣÷V樣總×W)
=138.89×(△A+0.012)÷W
2.以人參皂苷Re為對(duì)照品計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線(xiàn)為:y = 2.0466x - 0.0016,R2 = 0.9983,x為對(duì)照品濃度,mg/mL,y為吸光度△A。
總皂苷含量(μg/g干重)=(△A+0.0016)÷ 2.0466×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×1000
=488.62×(△A+0.0016)÷W
V樣:加入樣本體積,0.5mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本干重,g;1000,毫克到微克的換算系數(shù)。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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