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過氧化氫酶（Catalase，CAT）試劑盒分光光度法50管/48樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63335
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度：306
  • 庫存：32
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：過氧化氫酶（Catalase，CAT）試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:過氧化氫酶（Catalase CAT）試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

過氧化氫酶（Catalase，CAT）試劑盒

分光光度法

50管/48樣

CS-01Ｓ63335
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系統中具有重要作用。

商品介紹：

測定原理：

H2O2在240nm下有特征吸收峰，CAT能夠分解H2O2，使反應溶液240nm下的吸光度隨反應時間而下降，根據吸光度的變化率可計算出CAT活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

試劑組成和配制：

提取液：60mL×1瓶，4℃保存；

工作液：60mL×1瓶，4℃保存；

粗酶液提取：

1、細菌、細胞或組織樣品的制備：

細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟：

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至240nm處，蒸餾水調零。

2、測定前將CAT檢測工作液37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴10min。

3、在1mL石英比色皿中加入35μL樣本和1mL工作液，混勻，室溫下立即測定240nm下的初始吸光值A1和1min后的吸光值A2，計算ΔA=A1-A2

注意事項：出現負值怎么辦？

檢查反應過程是否產生氣泡，氣泡多說明酶活性太高，氣泡影響產生了負值，可以將樣本用提取液稀釋10倍后再檢測。如果稀釋樣本或反應體系沒有產生氣泡仍然出現較小的負值，說明該樣本測不到該酶活。

CAT活性計算：

1、血清（漿）CAT活力的計算:

單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

CAT(nmol/min/mL)= [ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=678×ΔA

2、組織、細菌或細胞中CAT活力計算：

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

CAT(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=678×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

CAT(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T=678×ΔA÷W

（3） 按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

CAT(nmol/min /104 cell)＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（500×V樣÷V樣總）÷T =1.356×ΔA

V反總：反應體系總體積，1.035×10-3 L；ε：H2O2摩爾消光系數，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.035 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，1 min；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；500：細胞或細菌總數，500萬。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

 

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5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。

  

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