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產(chǎn)品名稱	檢測方法	規(guī)格	貨號
總膽固醇（total cholesterol，TC）含量測定試劑盒	分光光度法	50管/48樣	CS-01Ｓ63339

注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

TC包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。

商品介紹：

測定原理：

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；最后利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰，其顏色深淺與TC含量成正比。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、異丙醇和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：異丙醇50mL（自備）。

試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；

試劑四：液體100μL×1瓶，4℃保存

TC標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，0.5μmol/mL，4℃保存。

TC的提取：

1、組織中TC的提取：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清，即TC待測液。

2、細(xì)胞、細(xì)菌中TC的提取：先收集400-500萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加1mL試劑一，超聲波破碎1min（強(qiáng)度20％，超聲2s，停1s），即TC待測液。

3、血清（漿）等樣品：直接測定。

測定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到500 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. TC工作液的配制：臨用前，吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中，充分溶解后再全部轉(zhuǎn)移回試劑二瓶中，充分混勻，TC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC標(biāo)準(zhǔn)液和900μL TC工作液，混勻，37℃靜置3h后于500nm測定A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測定管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC待測液和900μL TC工作液，混勻，37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。

5. 空白管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL 試劑一和900μL TC工作液，混勻，37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。

注意：標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測定一次。

計(jì)算公式：

1. 血清（漿）中TC含量：

TC（μ mol /dL）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）×100

= 50×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）

C標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μmol/mL；100 mL：1dL=100 mL。

2. 組織中TC含量：

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

TC（μ mol/mg prot）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷Cpr

= 0.5×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

TC（μ mol / g鮮重）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷W

= 0.5×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μmol/mL；樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中TC含量：

TC（μ mol /104 cell）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /L）

= 0.5×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /L）

C標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μmol/mL。

注意事項(xiàng)：

最低檢出限為1nmol/mL。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測，標(biāo)本對環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測免收代測費(fèi)，一周出結(jié)果。

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