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硝酸還原酶（Nitrate Reductase，NR）活性測定試劑盒分光光度法50管/24樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63368
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50管/24樣
  • 采購熱度：327
  • 庫存：21
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：硝酸還原酶（Nitrate Reductase，NR）活性測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:硝酸還原酶（Nitrate Reductase NR）活性測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

硝酸還原酶（Nitrate Reductase，NR）活性測定試劑盒

分光光度法

50管/24樣

CS-01Ｓ63368
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

NR（ EC 1.7.1.3）廣泛存在于植物中，是植物硝態氮轉化為氨態氮的關鍵酶，也是誘導酶，對作物的產量和品質有影響。

商品介紹：

測定原理

NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；產生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰，可用分光光度法測定。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

誘導劑儲備液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體10mL×1瓶，-20℃保存。

試劑二：液體8mL×1瓶，-20℃保存；

試劑三：液體15mL×1瓶，4℃保存，（如出現結晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）；

試劑四：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：標準儲備液1mL，-20℃保存。

誘導劑應用液的配制：用時將誘導劑儲備液稀釋10倍，即取10mL誘導劑儲備液加90mL蒸餾水，充分混勻。

0.1μmol/mL的標準液的配制：用時將試劑五稀釋100倍，即取 0.1ml試劑五加9.9mL蒸餾水，充分混勻。

樣品的前處理

動植物組織樣品的前處理：

（1）取適量誘導劑于燒杯中，將新鮮標本洗凈，濾紙吸干，放入誘導劑應用液中（淹沒即可），浸泡2h，取出樣本，濾紙吸干。

（2）按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

注意：

1、建議使用新鮮沒有冷凍過的樣本。

2、一般不要誘導處理，預測定結果沒有活性（A測定管≤A對照管）則需要誘導處理。

細菌或培養細胞的前處理：

先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至540nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定（在EP管中加入下列試劑）

注意：

1、標準管和空白管只需測一次，每個測定管設一個對照管。

2、誘導處理后的樣本對照管中試劑二改成加125μL蒸餾水。

NR活性計算：

（1）按樣本鮮重計算：

單位定義：每小時每g鮮重樣品中催化產生 1μmol NO2ˉ的量為一個 NR活力單位。

NR（μmol/h/g 鮮重）= (C標準管×V1)×（A測定管-A對照管）÷（A標準管-A空白管）÷(W×V1÷V2)÷T=0.2×（A測定管-A對照管）÷（A標準管-A空白管）÷W

（2）按樣本蛋白濃度計算：

單位定義：每小時每mg組織蛋白催化產生 1μmol NO2ˉ的量為一個 NR活力單位。

NR（μmol/h/mg prot）= (C標準管×V1)×（A測定管-A對照管）÷（A標準管-A空白管）÷(V1×Cpr)÷T=0.2×（A測定管-A對照管）÷（A標準管-A空白管）÷Cpr

C標準管：標準管濃度，0.1μmol/mL；V1：加入樣本體積：0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL；T：反應時間，0.5h；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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