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標(biāo)簽:尿素氮(BUN)試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
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兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
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非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
尿素氮(BUN)試劑盒 | 分光光度法 | 50T/48S | CS-01S63363 |
尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物,在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理
樣本中尿素氮在氯化高鐵一磷酸溶液中與二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一種紅色的二嗪化合物,其顏色的深淺與尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法測(cè)定尿素氮含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
試劑一:液體6mL×1瓶,4℃避光保存,
試劑二:液體60mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
1.組織:按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,勻漿后于25℃,10000g離心10min,取上清待測(cè)。
2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):蒸餾水體積(mL )為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL蒸餾水),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3.血清或其它液體:直接檢測(cè)。
測(cè)定操作
混勻,沸水浴10min,冷卻后,540nm下測(cè)定吸光值。△A=A測(cè)定-A空白?瞻坠苤灰鲆还。
尿素氮含量計(jì)算:
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y =2.048x + 0.0229,R2 = 0.9943;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。
1、按照血清(漿)或者細(xì)胞培養(yǎng)液體積計(jì)算
尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)
2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算
尿素氮含量mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷2.048×V樣總÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白濃度計(jì)算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr
V樣總:加入提取液體積,1 mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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