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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63365 |
NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測定原理
NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min)
樣品處理
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿。10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。
3.體液和培養(yǎng)液等其它液態(tài)樣品:直接測定。
測定步驟和操作表
混勻,室溫靜置15min, 1mL玻璃比色皿,測定A550,ΔA=A測定-A空白
NO含量計算
標準曲線回歸方程為:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986
1、組織樣品:
(1)按樣本質(zhì)量計算
NO含量(μmoL/g 鮮重)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 0.14×(ΔA +0.0103)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計算
NO含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣×Cpr)×10-3
= 0.14×(ΔA +0.0103)÷Cpr
2、細胞:
NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)×10-3
= 0.14×(ΔA +0.0103)÷細胞數(shù)量(萬個)
3、其他樣品:
NO含量(μmoL/L)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷V樣
= 140×(ΔA +0.0103)
V反總:反應(yīng)總體積,0.9mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.4mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當天可發(fā)貨。
3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測,標本對環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客戶)。
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