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產(chǎn)品名稱(chēng)	檢測(cè)方法	規(guī)格	貨號(hào)
乙醛脫氫酶（acetaldehyde dehydrogenase，ALDH）試劑盒	分光光度法	50管/48樣	CS-01Ｓ63380

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類(lèi)和許多動(dòng)物體內(nèi)，線粒體乙醛脫氫酶能把對(duì)生物體有害的醇類(lèi)轉(zhuǎn)化，所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注；同時(shí)，乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測(cè)方面有較廣泛的研究應(yīng)用。

商品介紹：

測(cè)定原理

在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在340nm處的吸光值會(huì)增加，測(cè)定340nm處的吸光值變化，可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體3mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體2mL×1支，4℃保存。

試劑五：液體2mL×1支，4℃保存。

ALDH提取

1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后，10000g，4℃，離心20min。

2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3.液體：直接檢測(cè)。

測(cè)定操作表

ALDH酶活計(jì)算

（1）按蛋白濃度計(jì)算

酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。

ALDH酶活（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Crp）÷T= 804×△A÷Cpr

（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。

ALDH酶活（nmol/min/g鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T = 804×△A÷W

（3）按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。

ALDH酶活（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)））÷T= 804×△A÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）

（4）按液體體積計(jì)算

酶活定義：每mL樣本每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。

ALDH酶活（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 804×△A

：NADH微摩爾消光系數(shù)，6.22×10-3 L/μmol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.2mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g，T：反應(yīng)時(shí)間：1min

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢(xún)客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專(zhuān)人取樣（限省內(nèi)客戶(hù)）。

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