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標(biāo)簽:淀粉分支酶(Starch branching enzyme SBE)試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)試劑盒 | 分光光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63377 |
SBE(EC
測定原理
直鏈淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE使直鏈淀粉含量減少,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值,一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×2支,4℃保存;臨用前每支加入1mL蒸餾水,95℃沸水浴充分溶解后備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
注意:
1、可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行5min 95℃水浴處理。
2、試劑二如有沉淀,務(wù)必沸水浴溶解后使用。
SBE活力單位的計(jì)算
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/mg prot)=( A對照管-A測定管)/A對照管÷Cpr ×100
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對照管-A測定管)/A對照管÷(W÷V樣總)×100
V樣總:提取液總體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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