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產(chǎn)品名稱	檢測(cè)方法	規(guī)格	貨號(hào)
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（Lignin peroxidase，Lip）試劑盒	分光光度法	50管/48樣	CS-01Ｓ63407

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。

商品介紹：

測(cè)定原理

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶催化天青脫甲基，在651nm處測(cè)定吸光值減少。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液器、冰。

試劑組成和配制

試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入80mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存1個(gè)月。

試劑二：液體12mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體12mL×1瓶，4℃保存。

酶液提取

1.組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3.培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測(cè)。

測(cè)定操作

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至651nm，蒸餾水調(diào)零。

2、臨用前按每個(gè)樣本試劑一：試劑二：試劑三= 400:200:200（μL）的比例配制工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

3、在1mL玻璃比色皿中依次加入如下試劑

酶活計(jì)算公式

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/mg prot）= ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.02÷T =125×ΔA÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每g組織在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.02÷T =125×ΔA÷W

3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/104 cell）＝ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.02÷T =0.25×ΔA

4．按照液體體積計(jì)算

酶活性定義：每mL血清（漿）在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/mL）=ΔA×V反總÷V樣÷0.02÷T =125×ΔA

V反總：反應(yīng)總體積，1mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.2mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，2min

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

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