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甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿，是生物體內(nèi)膽堿的氧化產(chǎn)物，可以增強免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進動物蛋白質(zhì)和脂肪代謝、增進食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。

商品介紹：

測定原理

甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在525nm處有特征吸收峰，測定525nm處的吸光值，可計算得樣品的甜菜堿含量。

自備實驗用品及儀器

天平、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、乙醚、鹽酸、丙酮和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體30mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：粉劑3瓶，4℃保存，臨用前根據(jù)用量配制，每瓶加40mL蒸餾水溶解，加780μL濃鹽酸調(diào)pH為1。

試劑二：99%乙醚，自備。取無水乙醚99mL，加入蒸餾水1mL，混勻。

試劑三：70%丙酮，自備。（易揮發(fā)，根據(jù)用量自備，丙酮：蒸餾水=7:3）。

甜菜堿提取

取烘干后過40目篩的樣品約0.04g，加1.6mL水，置于60℃提取30min，期間不斷震蕩。再加入400μL提取液，混勻后10000g，25℃，離心10min，取上清液。

測定操作表

1、分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至525nm。

2、操作表

甜菜堿含量計算公式

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 1.004x + 0.0057，R2 = 0.9993；x為甜菜堿濃度（mg/mL），y為吸光值。

甜菜堿含量（mg/g 干重）=（ΔA-0.0057）÷1.004× V標(biāo)準(zhǔn)÷(V樣÷V樣總×W)

=1.99×（ΔA-0.0057）÷W

V標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)品體積，1.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，1.2mL；V樣總：加入提取液體積，2mL；W：樣本質(zhì)量，g

注意事項

1、試劑一配制時pH嚴(yán)格控制為1，否則會導(dǎo)致反應(yīng)不完全，配制后4℃只能穩(wěn)定幾個小時，配制后盡快使用。

2、試劑二與試劑三對呼吸道有一定的刺激，請做好防護工作。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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