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1.組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液一）進行冰浴勻漿，10000g，4℃，離心10min，棄沉淀；把上清轉移到另一預冷的離心管，10000g，4℃，離心30min，棄上清；加入1.0 mL預冷的提取液二，震蕩混勻，16000g，4℃，離心40min，棄上清；沉淀加入預冷的1.0 mL 試劑一，震蕩混勻，即粗酶液（可用于可溶性蛋白濃度測定）取上清置于冰上待測。

2.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，棄沉淀；把上清轉移到另一預冷的離心管，10000g，4℃，離心30min，棄上清；加入1.0 mL預冷的提取液二，震蕩混勻，16000g，4℃，離心40min，棄上清；沉淀加入預冷的1.0 mL 試劑一，震蕩混勻，即粗酶液（可用于可溶性蛋白濃度測定），取上清置于冰上待測。

3.血清：直接測定。

測定操作表

注意：空白管只需測定一次。

MAO活性計算公式

1、按蛋白含量計算

酶活定義：37℃，pH7.6時，每毫克蛋白質1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性（nmol/min / mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 114×ΔA÷Cpr

2、按樣本質量計算

酶活定義：37℃，pH7.6時，每克樣品1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性（nmol/min / g 鮮重）=×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T = 114×ΔA÷ W

3、按照細胞數量計算

酶活定義：37℃，pH7.6時，每104 個細胞1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性（nmol/min / 104 cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量）÷T

= 114×ΔA÷細胞數量

4、按照液體體積計算

酶活定義：37℃，pH7.6時，每升血清1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性（nmol/min /L）=×V反總÷V樣=114000×ΔA

ε：底物摩爾消光系數，1.46 L/mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應中樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；T：反應時間，60min，W：樣本質量，g

注意事項

1、吸光度變化應該控制在0.01~0.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計算公式中參與計算的稀釋倍數要相應改變。

2、樣品蛋白質含量需要另外測定。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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