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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
山梨醇含量試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63419 |
山梨醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,不僅是糖運輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風味密切相關。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經常需要檢測山梨醇含量變化。
測定原理:
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡合物,在655nm波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體10mL×1瓶 ,4℃保存。
山梨醇的提取:
按照組織質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.2g組織,加入2mL蒸餾水),研磨成勻漿, 95℃水浴10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液待測。
測定步驟
1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至655nm,蒸餾水調零。
2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):
混勻后室溫靜置15min,8000g,25℃離心10min,取上清液測655nm下吸光值A,計算ΔA=A測定管-A空白管。空白管只要做一管。
山梨醇含量計算:
1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.352x - 0.002;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按照樣本質量計算
山梨醇含量(mg /g 鮮重)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計算
山梨醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入樣本體積,1mL;V2:加入提取液體積,2 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g
注意:最低檢測限為1μg/g鮮重或0.01μg /mg prot
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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