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β-木糖苷酶(β- xylosidase)測定試劑盒分光光度法50管/24樣

  • 產品貨號:CS-01S63428
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:50管/24樣
  • 采購熱度:251
  • 庫存:56
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:β-木糖苷酶(β- xylosidase)測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:β-木糖苷酶(β- xylosidase)測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

β-木糖苷酶(β- xylosidase)測定試劑盒

分光光度法

50/24

CS-0163428

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關鍵酶,產物木糖可作為碳源應用于微生物發酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業,比傳統的漂白法環保,具有廣泛的應用價值。

商品介紹:

測定原理

β-木糖苷酶催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產生對硝基苯酚,對硝基苯酚在405nm處有特征吸收峰,測定405nm光吸收增加速率,可計算β-木糖苷酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取

1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g4℃,離心20min,取上清待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3.液體:直接檢測。

測定操作表

β-木糖苷酶活性計算公式

標準曲線:y=13.226x+0.0011R2=0.9998x為標準品濃度(μmol/mL),y為吸光值ΔA

1、按蛋白濃度計算

酶活定義:45℃,pH7.4時每毫克蛋白1min內催化產生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/ mg prot=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷(V樣×Cpr)÷T×1000

= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr

2、按樣本質量計算:

酶活定義:45℃,pH7.4時每克樣品1min內催化產生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W

3. 按細胞數量計算:

酶活定義:45℃,pH7.4時每104個細胞1min內催化產生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/104cell=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷V樣×V樣總÷細胞數量(萬個)÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 細胞數量(萬個)

4)按液體體積計算

酶活定義:45℃,pH7.4時每毫升液體1min內催化產生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/ mL=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷V樣÷T×1000

=11.34×(ΔA-0.0011)

V樣總:加入提取液體積,1mL V反總:反應總體積,0.6mLV樣:反應中樣品體積,0.2mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mLW:樣品質量,gT:反應時間,20min1000:1μmol/mL=1000nmol/mL

ΔA控制在0.01-2范圍內,若ΔA大于2,可適當減小樣本量。

標準曲線線性范圍為:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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