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木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養物質的吸收利用，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業中，ACX一般分離自耐酸的真菌，細菌及部分霉菌。

商品介紹：

測定原理

ACX在酸性環境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發生顯色反應，在540nm處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比，通過測定反應液在540nm吸光值增加速率，可計算ACX活力。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋，可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

緩沖液：液體90mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體12mL×1瓶，4℃避光保存。（若出現白色絮狀或顆粒狀沉淀，可60℃加熱溶解后使用）。

試劑二：液體18mL×1瓶，4℃避光保存。

粗酶提取

1.發酵液：發酵液于8000g，4℃，離心15min，取上清，作為待測樣品。

2.酶干粉：稱約0.1mg，加1mL緩沖液溶解待測。

3.組織樣本：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL緩沖液）進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃，離心10min，取上清待測。

測定操作表

ACX計算公式

標準曲線：y = 2.5554x - 0.002 ，R2 = 0.9983

1. 按液體體積活力計算：

酶活定義：50℃，pH4.8條件下，每毫升液體樣本每分鐘分解木聚糖產生1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位。

ACX活力（nmol/min/mL）= （ΔA+0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋倍數×106

= 435× (ΔA+0.002)

2. 按蛋白濃度計算：

酶活定義：50℃，pH4.8條件下，每毫克蛋白每分鐘分解木聚糖產生1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位。

ACX活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋倍數×106÷Cpr

= 435×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr

3. 按鮮重計算：

酶活定義：50℃，pH4.8條件下，每克樣本每分鐘分解木聚糖產生1nmol 還原糖所需的酶量為一個酸性木聚糖酶的活力單位。

ACX活力（nmol/min/g鮮重）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋倍數×106÷W

= 435×(ΔA +0.002 ) ÷W

150：木糖的分子量；T：反應時間，30min；稀釋倍數=V反總÷V樣=1000μL÷200μL=5；

106：轉化因子，即1mg/mL=106ng/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。

注意事項

1. 吸光度變化應該控制在0.01~0.8之間，否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計算公式中參與計算的稀釋倍數要相應改變。

2. 試劑盒2-8℃保存，保質期3個月，建議盡快使用。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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