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6PG (Glucose-6-phosphate，葡萄糖-6-磷酸，又稱6-磷酸葡萄糖)，是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物，廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應中，葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸，然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸，以繼續糖酵解的其它步驟；而在戊糖磷酸途徑中，葡萄糖-6-磷酸是其第一個底物，該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外，葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

商品介紹：

測定原理：

6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色，在450 nm下測定吸光值。

需自備的儀器和用品：

分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體60 mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體30mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；

試劑三：液體3mL×1瓶， 4℃避光保存。

6PG提取：

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）， 8000g，25℃離心10min，取上清待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿，8000g，25℃離心10min，取上清待測。

3、血清（漿）等液體樣品：直接測定。

測定步驟：

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至450nm，蒸餾水調零。

2、試劑二的配制：臨用前加入8mL水充分溶解待用，用不完的試劑分裝后-20℃保存；

3、工作液的配制：臨用前按照樣本數量，按以下比例配制工作液

6PG含量計算：

1、標準條件下測定回歸方程為y = 7.7178x - 0.0016，R2 = 0.997； x為6PG含量（μmol/mL），y為吸光值。

2、按照血清（漿）體積計算

6PG含量（nmol/mL）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷×V1×1000

=129.6×(△A+0.0016)

3、按照蛋白濃度計算

6PG含量（nmol/mg prot）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷(V1×Cpr)×1000

=129.6×(△A+0.0016) ÷Cpr

4、按照樣品質量計算

6PG含量（nmol/g鮮重）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷(W ×V1÷V2）×1000

=129.6×(△A+0.0016) ÷W

3、按照細菌或細胞密度計算

6PG含量（nmol/104 cell）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷（500×V1÷V2）×1000

=0.259×(△A+0.0016)

V1：加入反應體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1 mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500萬；1000，μmol到nmol的換算系數。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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