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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
FDA水解酶(Fluorescein diacetate,FDA)試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63464 |
FDA水解反應能很好的反應土壤中微生物活性和土壤質量的變化以及生態系統中有機質的轉化,是土壤質量研究中的重要生物學指標之一。
測定原理
FDA是一種無色化合物,在介質中能被許多土壤酶所催化水解,并經脫水反應,產生酶解終產物熒光素,穩定不易被分解,并在490nm處有強吸收峰,通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
標準液:液體5mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加5mL試劑三溶解。
試劑三:液體50mL×1瓶,4℃保存。
樣本處理
稱取風干過30-50目篩土壤約0.1g,備用。
測定操作表
注意:空白管和標準管只需測定一次。
酶活性計算公式
酶活性定義:每克土壤每天產生1μmol熒光素的量為一個酶活力單位。
FDA活性(μmol/d/g 干重)=(△A2÷△A1×C標準品)×V反總÷W
= 2.4×(△A2÷△A1)÷W
C標準品:標準品濃度100μmol/L;V反總:反應總體積,1mL;W:樣本質量,g
注意事項
1.盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準確反映酶的活性。
2.測定之前進行預實驗,若吸光值較高,請進行適當的稀釋再測定,并在計算公式中乘以稀釋倍數。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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