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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
土壤堿性蛋白酶(Solid - Alcalase Protease,S-ALPT)試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63465 |
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在堿性環境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。
測定原理:
堿性條件下,S-ALPT可將酪蛋白水解產生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm有特征吸收峰。
實驗中所需儀器及設備:
可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入6ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入2mL試劑七,沸水浴加熱溶解,然后加入8ml試劑一,充分混勻備用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入40ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;
試劑五:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑六:液體1.5mL×1支,0.05mg/ml標準酪氨酸溶液;
試劑七:液體5mL×1瓶,4℃保存;
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。
測定操作:
1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至680nm,蒸餾水調零。
2、試劑二、三和四40℃水浴10min。
3、樣本測定:
混勻,40℃水浴20min,8000g 25℃離心10min,取上清液,680nm下讀取各管吸光值A
注意:標準管只需測一次。每個測定管設一個對照管。
S-ALPT活性計算:
單位定義:每天每g土樣中產生1mg酪氨酸為一個 S-ALPT活力單位。
S-ALPT(mg/d/g土樣)=C標準×(A測定管-A對照管)÷A標準管×V反總÷W÷T=24×(A測定管-A對照管)÷A標準管
C標準管:標準管濃度,0.05mg/mL;V反總:反應體系總體積,0.4mL;T:反應時間,30min=1/48d; W:樣本質量,0.04g。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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