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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63454 |
β-木糖苷酶(EC
測定原理
S-β-XYS催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對硝基苯酚,對硝基苯酚在405nm處有特征吸收峰,測定405nm光吸收增加速率,可計算S-β-XYS活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
約0.1g鮮土或風(fēng)干土樣,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,室溫振蕩提取30min,然后10000g,4℃,離心10min,取上清待測。
測定操作表:
1、分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至405nm。
2、操作表
β-木糖苷酶活性
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL),y為吸光值ΔA。
酶活定義:每克土樣每天催化產(chǎn)生1μmol對硝基苯酚的酶量為一個酶活單位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土樣)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V樣總:加入提取液體積,1mL; V反總:反應(yīng)總體積,0.6mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.2mL; W:樣品質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,20min=1/72d;
ΔA控制在0.01-2范圍內(nèi),若ΔA大于2,可適當(dāng)減小樣本量。
標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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