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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
果糖-1,6-二磷酸(Fructose-1,6 Diphosphate,FDP)試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63450 |
果糖1,6-二磷酸是機體內的高能代謝物和代謝調控劑,是糖酵解途徑的重要中間體,廣泛存在于動植物和微生物體內,能影響細胞內鉀離子的濃度,改善葡萄糖和其他能量底物的代謝,促進組織氧的釋放,廣泛應用于臨床醫藥制劑。
測定原理
醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解,產物與DNPH縮合成紫紅色物質,在540nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。
試劑組成和配制
試劑一:液體65mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體1mL×1支,4℃避光保存。
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體40mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理
1.組織:按照質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。
2.細胞:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清待測。
3.液體:直接檢測。
測定操作
計算公式
標準曲線:y= 0.6971x+0.0012,R2=0.9983
1.按照質量計算
FDP(mg/g 鮮重)= (△A-0.0012) ÷0.6971÷(W÷V樣總)
= 1.43×(△A-0.0012)÷W
2.按照細胞數量計算
FDP(mg/104 cell)= (△A-0.0012) ÷0.6971÷(細胞數量÷V樣總)
= 1.43×(△A-0.0012)÷細胞數量
3.按照液體體積計算
FDP(mg/mL)= (△A-0.0012) ÷0.6971
= 1.43×(△A-0.0012)
W:樣本質量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL
注意事項
最低檢出限為1.72 mg/L。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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