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葉綠體復合體Ⅴ試劑盒分光光度法25管/12樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63505
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:25管/12樣
  • 采購熱度：389
  • 庫存：27
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：葉綠體復合體Ⅴ試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:葉綠體復合體Ⅴ試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

葉綠體復合體Ⅴ試劑盒

分光光度法

25管/12樣

CS-01Ｓ63505
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

葉綠體復合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶，由F1和F0兩個亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產生的質子電化學梯度催化ATP合成，也可逆過程水解ATP。復合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關鍵酶。

商品介紹：

測定原理

復合體Ⅴ水解ATP產生ADP和Pi，通過測定Pi增加速率來測定復合體Ⅴ活性。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

試劑一：25mL×1瓶，-20℃保存；

試劑二：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前每支加入1.3mL蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存;

試劑三：6mL×1瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入3mL蒸餾水，充分混勻；溶解后4℃保存一周；

試劑五：粉劑×1瓶, 4℃保存；臨用前加入10mL蒸餾水，充分混勻；溶解后4℃保存一周；

試劑六：粉劑×1瓶, 4℃保存；臨用前加入10mL蒸餾水，充分混勻；溶解后4℃保存一周；

試劑七：液體10mL×1 瓶，室溫保存。

定磷試劑的配制：按H2O: 試劑五:試劑六:試劑七=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷試劑應為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染（請根據需要，用多少配多少）。

注意：配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿，以避免磷污染。

葉綠體的提取：

①稱取約0.1g組織或收集500萬細胞，加入1mL試劑一，用冰浴勻漿器或研缽勻漿，很快研磨或搗碎，30秒內完成，使之成為勻漿液。

②將勻漿液于200g（離心率），4℃離心1min。

③棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，1500g，4℃離心5min。

④棄上清液，于沉淀中加入0.5mL試劑一混勻配成葉綠體懸浮液?；靹蚝鬁y定葉綠體酶活性。

測定步驟

復合體Ⅴ活性計算

標準條件下測定的回歸方程為y = 1.274x + 0.004；x為標準品濃度（mmol/L），y為A值。

1、組織中復合體Ⅴ活性的計算:

（1） 按樣本蛋白濃度計算

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘產生1 nmol 無機磷定義為一個酶活性單位。

復合體Ⅴ活性（nmol/min/mg prot）=[(ΔA-0.004) ÷1.274×V反總×106]÷(V樣×Cpr) ÷T

=62.8× (ΔA-0.004) ÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

（2） 按樣本鮮重計算

單位的定義：每g組織每分鐘產生1 nmol 無機磷定義為一個酶活性單位。

復合體Ⅴ活性（nmol/min /g 鮮重）=[(ΔA-0.004) ÷1.274×V反總×106]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T =31.37× (ΔA-0.004) ÷W

（3） 按細菌或細胞密度計算

單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘產生1 nmol 無機磷定義為一個酶活性單位。

復合體Ⅴ活性（nmol/min /104 cell）=[(ΔA-0.004) ÷1.274×V反總×106]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.063× (ΔA-0.004)

V反總：反應體系總體積，3×10-4 L； V樣：加入樣本體積，0.125 mL；V樣總：加入提取液體積，0.5 mL；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細胞或細菌總數，500萬。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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訂貨流程

產品訂購說明:

  

1、報價含普票、運費。

 

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

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