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標(biāo)簽:土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶(S-C1)活性測(cè)定試劑盒
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產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶(S-C1)活性測(cè)定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63501 |
C1(EC
測(cè)定原理:
采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定C1催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體60mL×1瓶,4℃保存;
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
稱取約0.1g新鮮土樣或風(fēng)干土樣,加入1mL提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,室溫振蕩提取30min,然后10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):
S-C1活性計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值。
單位的定義:每g土樣每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。
S-C1活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/mL=1000ug/mL;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.55mL; V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,120 min;W:樣本質(zhì)量,g。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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