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標(biāo)簽:土壤植酸酶(phytase)試劑盒
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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
土壤植酸酶(phytase)試劑盒 | 分光光度法 | 50T/24S | CS-01S63491 |
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環(huán)境的污染,改善營養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價值。
測定原理
植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機(jī)磷與肌醇衍生物,無機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。
試劑的組成和配制
緩沖液:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加緩沖液30mL配制,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑4℃保存一個月。
試劑二:液體30mL×1瓶,4℃保存。
顯色劑:粉劑×6瓶,4℃避光保存,臨用前根據(jù)用量每瓶加1mL雙蒸水溶解,再加4mL試劑二混勻。
樣本處理
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
測定操作表
酶活性計算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.759x + 0.0084,R2 = 0.9977;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL),y為吸光值△A。
酶活性定義:在37℃,pH5.5的條件下,每克土樣每小時從5mmol/L的植酸鈉溶液中釋放出1μmol的無機(jī)磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性(μmol/h /g 土樣)=(△A-0.0084)÷1.759×V反總÷W÷T
=0.41×(△A-0.0084)
V反總:反應(yīng)總體積,1.04mL;T:反應(yīng)時間,24h;W:樣本質(zhì)量,0.06g。
注意事項
1、顯色劑需要臨用前根據(jù)用量配制,每一瓶是5個樣本的用量,新配制的顯色劑若有顏色則已經(jīng)污染或者試劑過期,應(yīng)放棄使用。
2、ΔA線性范圍為0.01-1。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請咨詢客服。
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