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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
土壤脂肪酶(Solid-Lipase,S-LPS)活性試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63492 |
LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
測定原理:
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測定脂肪酸生成速率,即可計算LPS活性。
自備儀器和用品:
研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、甲苯100mL、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體90mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體14mL×1瓶,4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩20min。
試劑三:甲苯100mL×1瓶,4℃保存(自備)。
試劑四:液體20mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體10μL×1瓶,10 μmol/mL的標準溶液,4℃保存。臨用前加入3.168 mL甲苯,充分溶解。
樣本處理
建議稱取約0.1g土樣,加入1mL試劑一進行冰浴勻漿,再用回旋式振蕩器振蕩提取15min,4℃,4000g離心10min,取上清待測。
S-LPS測定操作:
1.分光光度計預熱30 min以上,調節波長到710 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預熱30min以上。
3.在5mL EP管中依次加入下列試劑
注意:空白管和標準管只需測定一次。
S-LPS活性計算公式:
活性單位定義:37℃中每克土樣每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
S-LPS (μmol/min/g 土樣) = [C標準品×(A測定管-A空白管)÷(A標準管- A空白管)]×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=16×[(A測定管-A空白管)÷(A標準管- A空白管)]÷W
C標準品:10 μmol/mL;V反總:反應總體積,2mL;V樣:反應中加入樣本體積,0.125mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質量,g;T:催化反應時間,10 min。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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