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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
土壤中性蛋白酶(Solid - Neutral Protease,S-NPT)試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63490 |
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。
測(cè)定原理:
中性條件下,S-NPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);在680nm有特征吸收峰。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、蒸餾水
試劑組成和配置:
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入6ml蒸餾水充分溶解;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入2mL試劑七,沸水浴加熱溶解,然后加入8ml試劑一,充分混勻備用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入40ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;
試劑五:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑六:液體1.5mL×1支,0.05mg/ml標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液,4℃保存;
試劑七:液體5mL×1瓶,4℃保存;
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。
測(cè)定操作:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至680nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測(cè)定:
混勻,40℃水浴20min,8000g 25℃離心10min,取上清液1mL,680nm下讀取各管吸光值A
注意:標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)一次。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-NPT活性計(jì)算:
單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg酪氨酸為一個(gè) S-NPT活力單位。
S-NPT(mg/d/g土樣)=C標(biāo)準(zhǔn)×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管×V反總÷W÷T=24×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管
C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.05mg/mL;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.4mL;T:反應(yīng)時(shí)間,30min=1/48d; W:樣本質(zhì)量,0.04g。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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