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二胺氧化酶（Diamine Oxidase，DAO）試劑盒分光光度法50管/24樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63511
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50管/24樣
  • 采購熱度：587
  • 庫存：39
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：二胺氧化酶（Diamine Oxidase，DAO）試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:二胺氧化酶（Diamine Oxidase DAO）試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

二胺氧化酶（Diamine Oxidase，DAO）試劑盒

分光光度法

50管/24樣

CS-01Ｓ63511
   注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物（腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關，能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

商品介紹：

測定原理

DAO催化尸胺產生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯茴香胺生成氧化型鄰聯茴香胺，在460nm處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加速率，計算DAO活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體80mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體0.6mL×1支，4℃保存。

試劑二：液體6mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體3mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取

1.組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測。

2.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

3.血清等液體：直接測定。

測定操作表

酶活性計算公式

（1）按樣本蛋白濃度計算：

酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。

DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr

（2）按樣本質量計算：

酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

DAO活性（nmol/min/g）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W

（3）按細胞數量計算：

酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量）÷T= 18×A460÷細胞數量

(4) 按液體體積計算

酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460

ε：氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應中樣本體積，0.25mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；T：反應時間，30min

注意事項

1、如果OD值小于0.01，適當加大提取用的樣本質量； OD值大于0.8，粗酶液可適當稀釋，或者減少提取用樣本量。

2、樣品蛋白質含量需要另外測定。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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