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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
尿酸(Uric Acid, UA)含量測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63532 |
UA是鳥類和爬行類動物的主要代謝產物,正常人體尿液中產物主要為尿素,含少量尿酸。此外,UA還是重要的抗氧化劑,能清除超氧化物,羥自由基等。體內UA生成量和排泄量不平衡會導致多種疾病的發生。例如,血中UA升高會引起痛風、腎功能損害和動脈硬化,相反UA降低會引起惡性貧血,在臨床診斷上具有重要的意義。
測定原理
尿酸酶能催化UA生成尿囊素,CO2及H2O2,H2O2 氧化亞鐵氰化鉀中的Fe2+ 生成Fe3+ ,Fe3+進一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類化合物,在505nm下有特征吸收峰,測定反應體系505nm的吸收值,可計算尿酸的含量。
自備實驗用品及儀器
恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制
緩沖液:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:
A. 用于標準管和測定管,粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加10mL緩沖液溶解。
B. 用于空白管,粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加5mL緩沖液溶解。
試劑二:粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加10mL雙蒸水水置于60℃加熱溶解。
樣品的制備:
1.動植物組織:建議稱取約0.1g組織,加入1mL生理鹽水或蒸餾水,進行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2.血清,培養液:直接檢測。
測定操作表
UA含量計算公式
1. 組織:
(1)按樣本重量計算
尿酸含量(μmol/g 鮮重)=C標準品×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷ (W÷V樣總)=0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷ W
(2)按樣本蛋白濃度計算
尿酸含量(μmol/mg prot)=C標準品×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷ Cpr =0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr
尿酸(μmol/L)= C標準品×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)×103
=500×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
C標:標準品濃度0.5μmol/mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;103 :1μmol/ L=103μmol/ mL
注意事項
1. 血清樣本請在24小時內測定,或者4℃密封避光保存不超過72小時。
2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本,并在計算公式中算入稀釋倍數。
3. 最低檢出限為10μmol/L。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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