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細胞色素b5（Cytochrome b5）含量測定試劑盒微量法100T/96S

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63563
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:100T/96S
  • 采購熱度：547
  • 庫存：36
  • CAS號：
  • 方法：微量法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：細胞色素b5（Cytochrome b5）含量測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:細胞色素b5（Cytochrome b5）含量測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

細胞色素b5（Cytochrome b5）含量測定試劑盒

微量法

100T/96S

CS-01Ｓ63563
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

細胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶，在外源物質代謝中具有重要作用，尤其是藥物和毒物的代謝。細胞色素P450和細胞色素b5是P450酶系的兩個血紅素蛋白，其比值的變化與P450代謝活性密切相關。

商品介紹：

測定原理：

氧化型細胞色素b5經連二亞硫酸鈉還原后，在424nm處有最大吸收峰，通過測定424nm和490nm處吸光值的差異，即可計算出細胞色素b5的含量。

自備儀器和用品：

普通離心機，超速離心機、可調式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：粉劑×2瓶，4℃保存。臨用前各加100mL蒸餾水，充分溶解。

試劑二：液體×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。

工作液配制：臨用前配制，戴一次性手套，小心打開試劑三瓶蓋，加試劑二20mL充分溶解，4℃避光可保存1周。

樣品中細胞色素b5提取：

1、除去細胞核，線粒體等大分子物質：稱約0.5g組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃離心30min，取上清液，轉入超速離心管中。

2、粗制微粒體：100 000g，4℃離心60min，棄上清液。

3、除血紅蛋白等雜質：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。

4、待測液：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5mL，蓋緊后充分震蕩溶解，即待測液，該待測液需當天測定。

細胞色素b5含量測定操作：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min。

2. 工作液置于25℃水浴中預熱30 min。

3. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入10 μL蒸餾水，200μL工作液，室溫靜置2 min，424nm和490nm處吸光值，424nm處吸光值記為A空白管1，490nm處吸光值記為A空白管2。△A空白管= A空白管1- A空白管2

4. 測定管：取1mL玻璃比色皿，加入10 μL待測液，200μL工作液，室溫靜置2 min，424nm和490nm處吸光值，424nm處吸光值記為A測定管1，490nm處吸光值記為A測定管2。

△A測定管= A測定管1- A測定管2。

注意：只需要做一個空白管。

樣品細胞色素b5含量計算公式：

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

（1）按蛋白濃度計算

細胞色素b5含量(nmol/mg prot) = (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總÷（Cpr×V樣）

= 122.8×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr

（2）按樣本質量計算

細胞色素b5含量（nmol/g 鮮重）= (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總×（V樣總÷V樣）÷W

= 61.4×(△A測定管-△A空白管)÷W

ε：還原型細胞色素b5納摩爾消光系數，171×10-6 L/nmol/cm；d：比色皿光徑（cm），1cm； V反總：反應體系總體積，210 μL =2.1×10-4 L；Cpr：待測液蛋白質濃度（mg/mL），需要另外測定；V樣：加入反應體系中待測液體積，10 μL=0.01 mL；V樣總：待測液總體積，0.5 mL；W：樣品質量（g）。

b.使用96孔板測定的計算公式如下

（1）按蛋白濃度計算

細胞色素b5含量(nmol/mg prot) = (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總÷（Cpr×V樣）

= 245.6×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr

（2）按樣本質量計算

細胞色素b5含量（nmol/g 鮮重）= (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總×（V樣總÷V樣）÷W

= 122.8×(△A測定管-△A空白管)÷W

ε：還原型細胞色素b5納摩爾消光系數，171×10-6 L/nmol/cm；d：96孔板光徑（cm），0.5cm； V反總：反應體系總體積，210 μL =2.1×10-4 L；Cpr：待測液蛋白質濃度（mg/mL），需要另外測定；V樣：加入反應體系中待測液體積，10 μL=0.01 mL；V樣總：待測液總體積，0.5 mL；W：樣品質量（g）。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

 

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。

  

6、代測免收代測費，一周出結果。

7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發 損壞產品。

8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶）。

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普票匯款信息

  

賬 戶 名：上海生物

 

開 戶 行：中國銀行山東省分行營業部

  

賬 號：2169 2341 6278

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