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酸性磷酸酶(ACP)活性測定試劑盒分光光度法50管/24樣

  • 產品貨號:CS-01S63562
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:50管/24樣
  • 采購熱度:440
  • 庫存:35
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:酸性磷酸酶(ACP)活性測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:酸性磷酸酶(ACP)活性測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

酸性磷酸酶(ACP)活性測定試劑盒

分光光度法

50/24

CS-0163562

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。

商品介紹:

測定原理:

在酸性環境中,ACP催化對硝基苯磷酸二鈉水解生成4-硝基苯酚,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、可調式移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體25mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、10000g離心10min,取上清液待測。

2.細菌或細胞:按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3.血液可直接測定,或者適當稀釋后測定。

測定:

1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到405 nm

2. EP 管中加入下列試劑

ACP活性計算:

標準曲線 y = 14.6672x + 0.0179R2 = 0.9996x為標準品濃度(μmol/mL),y為吸光值ΔA

1. 血液中ACP活性計算

活性單位定義:30℃中每毫升血液每分鐘催化產生1μmol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。

ACP活力(μmol/min/mL)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V反總÷T÷V

= 0.2273 ×(ΔA-0.0179

2. 組織、細菌或細胞中ACP活性計算

1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:30℃中每毫克蛋白每分鐘催化產生1 μmol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。

ACP活力(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V反總÷T÷(V樣×Cpr)

=0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷Cpr

2)按照樣本質量計算

活性單位定義:30℃中每克組織每分鐘催化產生1 μ mol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。

ACP活力 (μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V反總÷T÷(W×V 樣÷V 樣總)

= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷W

3)按照細菌或細胞數量計算

活性單位定義:30℃中每104個細菌或細胞每分鐘催化產生1 μ mol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。

ACP活力 (μmol/min/104 cell)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V反總÷T ÷(細胞數量×V 樣÷V 樣總)

= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷細胞數量

V反總:反應體系總體積(mL),1 mL W :樣品質量,g V樣:加入反應體系中樣本體積(mL),0.01 mLV樣總:提取液體積,1 mLT:反應時間(min),30 min500:細胞或細菌總數,500萬。

注意事項:

ACP不穩定,尤其在37℃和pH大于7的條件下活力喪失快,因此酸性磷酸酶樣品一般需當天準備;血清樣品中,每毫升血清中加入10mg檸檬酸氫二鈉或者5mg硫酸氫鈉,使pH降至6.5以下,或5ml血清加入30%醋酸溶液23滴,置于4℃可保存1周。

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

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