在線訂購 免費訂購熱線:021-59541103 021-60443211
聯系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機:13585831301
Q Q: 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細地址:上海嘉定區嘉羅公路1661
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
酸性磷酸酶(ACP)活性測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63562 |
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
測定原理:
在酸性環境中,ACP催化對硝基苯磷酸二鈉水解生成4-硝基苯酚,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、可調式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、10000g離心10min,取上清液待測。
2.細菌或細胞:按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.血液可直接測定,或者適當稀釋后測定。
測定:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到405 nm。
2. 在 EP 管中加入下列試劑
ACP活性計算:
標準曲線 y = 14.6672x + 0.0179;R2 = 0.9996;x為標準品濃度(μmol/mL),y為吸光值ΔA。
1. 血液中ACP活性計算
活性單位定義:30℃中每毫升血液每分鐘催化產生1μmol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。
ACP活力(μmol/min/mL)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V反總÷T÷V樣
= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)
2. 組織、細菌或細胞中ACP活性計算
(1)按照蛋白濃度計算
活性單位定義:30℃中每毫克蛋白每分鐘催化產生1 μmol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。
ACP活力(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V反總÷T÷(V樣×Cpr)
=0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷Cpr
(2)按照樣本質量計算
活性單位定義:30℃中每克組織每分鐘催化產生1 μ mol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。
ACP活力 (μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V反總÷T÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷W
(3)按照細菌或細胞數量計算
活性單位定義:30℃中每104個細菌或細胞每分鐘催化產生1 μ mol 4-硝基苯酚定義為1個酶活單位。
ACP活力 (μmol/min/104 cell)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V反總÷T ÷(細胞數量×V 樣÷V 樣總)
= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷細胞數量
V反總:反應體系總體積(mL),1 mL; W :樣品質量,g; V樣:加入反應體系中樣本體積(mL),0.01 mL;V樣總:提取液體積,1 mL;T:反應時間(min),30 min;500:細胞或細菌總數,500萬。
注意事項:
ACP不穩定,尤其在37℃和pH大于7的條件下活力喪失快,因此酸性磷酸酶樣品一般需當天準備;血清樣品中,每毫升血清中加入10mg檸檬酸氫二鈉或者5mg硫酸氫鈉,使pH降至6.5以下,或5ml血清加入30%醋酸溶液2~3滴,置于4℃可保存1周。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
留言注意事項:
1.遵守中華人民共和國有關法律、法規,尊重網上道德,承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。
2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經本站同意,任何人不得利用本留言簿發布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。
您感興趣的產品* | |
您的單位* | |
聯系人* | |
聯系電話* | |
詳細地址* | |
常用郵箱* | |
請輸入您對我們的意見或建議* | |
驗證碼* | |
產品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。
3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。
6、代測免收代測費,一周出結果。
7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收,做退回。我們將在24小時之內為您補發 損壞產品。
8、如因單位財務制度原因,可申請先發貨,報賬后付款(此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶)。
普票匯款信息
賬 戶 名:上海生物
開 戶 行:中國銀行山東省分行營業部
賬 號:2169 2341 6278