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吲哚乙酸氧化酶活性測定試劑盒分光光度法50T/48S

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63561
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50T/48S
  • 采購熱度：397
  • 庫存：34
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：吲哚乙酸氧化酶活性測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:吲哚乙酸氧化酶活性測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

吲哚乙酸氧化酶活性測定試劑盒

分光光度法

50T/48S

CS-01Ｓ63561
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

吲哚乙酸（IAA）在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破壞失去活性。植物體內吲哚乙酸氧化酶活力的大小，對調節體內吲哚乙酸的水平，起著重要的作用，而影響植物的生長。

商品介紹：

測定原理：

在無機酸存在情況下，吲哚乙酸能與FeCl3作用，生成紅色螯合物，該物質在530nm處有最大吸收峰，酶活力的大小可以其破壞吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法測定。

自備儀器和用品：

低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、可見分光光度計/酶標儀、1.5mL離心管、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體120mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑四：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：液體2mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑六：液體50mL×1瓶，4℃保存。臨用前吸取1mL試劑五加入試劑六中混勻，待用，避光保存

粗酶液提取：

1.組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。

2.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

3.血清等液體：直接測定。

測定操作：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長到530 nm，蒸餾水調零。

2. 試劑二、試劑三、試劑四置于25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動物）水浴中保溫20min。

3. 取1.5mL EP管若干，操作表如下：

IAA氧化酶活性計算公式：

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

IAA標準曲線公式：y = 1.334x + 0.025  R2 = 0.998 （x為IAA濃度，mmol /L；y為吸光值）

（1）按蛋白濃度計算

酶活定義：從開始時加入的IAA量減去酶作用后殘留的IAA含量，即得被酶所催化的IAA含量。以每mg酶蛋白在1h內分解破壞的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U（μmol/h/mg prot）=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V樣÷（V樣×Cpr）÷T

=1.5×（A1-A2）÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算

酶活定義：以每g樣本在1h內分解破壞的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U（μmol/h/g 鮮重）=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V樣÷(V樣÷V樣總×W) ÷T

=1.5×（A1-A2）÷W

（3）按細胞數量計算

酶活定義：以每1萬個細胞在1h內分解破壞的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U（μmol/h/104 cell）=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V樣÷(V樣÷V樣總×W) ÷T

=1.5×（A1-A2）÷細胞數量

（4）按液體體積計算

酶活定義：以每mL酶液在1h內分解破壞的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U（μmol/h/mL）=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V樣÷(V樣÷V樣總) ÷T

=1.5×（A1-A2）

V樣總：上清液總體積，1mL；V樣：加入反應體系中上清液體積，20μL=0.02 mL；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL；W：樣品質量，g，T：反應時間，0.5h。

注意事項：

1.最低檢出限為0.01μmol/mL。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

 

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

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