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2.細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。

3.血清：直接測定。

測定操作

酶活計算公式

1．按照蛋白濃度計算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/mg prot）= ×C標準÷Cpr÷T= 16.7 ×÷Cpr

2．按照樣本質量計算

酶活性定義：每克組織每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/g 鮮重）= ×C標準÷W÷T = 16.7×÷W

3．按照細胞數量計算

酶活性定義：每104個細胞每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/104 cell）= ×C標準÷細胞數量÷T = 16.7×÷細胞數量

4．按照液體體積計算

酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/mL）= ×C標準÷T=16.7×

C標準：標準品濃度，500nmol/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g/mL；T：反應時間，30min

注意事項

1.顯色完成后，若有沉淀，于8000g，25℃離心5min后取上清測定。

2.吸光值不宜超過1，否則用試劑一將酶液進行稀釋，并在計算公式中乘以稀釋倍數。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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