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磷脂酶D（?PhospholipasesD，PLD）試劑盒分光光度法50管/48樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63553
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度：496
  • 庫存：25
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：磷脂酶D（?Phospholipases?D，PLD?）試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:磷脂酶D（?Phospholipases?D PLD?）試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

磷脂酶D（PhospholipasesD，PLD）試劑盒

分光光度法

50管/48樣

CS-01Ｓ63553
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰膽堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動植物和細菌等多種生物體中，具有參與細胞脂質代謝、信號傳導、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

商品介紹：

測定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿，膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫，過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉紅色物質，在500nm處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無水乙醇。

試劑組成和配制

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體55mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體8mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前加3mL無水乙醇充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑四：液體35mL×1瓶，4℃避光保存。

標準品：液體1mL×1支，4℃避光保存。

酶液提取

1.組織：按照質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。

2.細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。

3.血清：直接測定。

測定操作

酶活計算公式

1．按照蛋白濃度計算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/mg prot）= ×C標準÷Cpr÷T= 16.7 ×÷Cpr

2．按照樣本質量計算

酶活性定義：每克組織每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/g 鮮重）=  ×C標準÷W÷T = 16.7×÷W

3．按照細胞數量計算

酶活性定義：每104個細胞每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/104 cell）= ×C標準÷細胞數量÷T = 16.7×÷細胞數量

4．按照液體體積計算

酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量一個酶活力單位。

PLD活性（nmol/min/mL）=  ×C標準÷T=16.7×

C標準：標準品濃度，500nmol/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g/mL；T：反應時間，30min

注意事項

1.顯色完成后，若有沉淀，于8000g，25℃離心5min后取上清測定。

2.吸光值不宜超過1，否則用試劑一將酶液進行稀釋，并在計算公式中乘以稀釋倍數。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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