產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱	檢測(cè)方法	規(guī)格	貨號(hào)
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）試劑盒	分光光度法	50管/24樣	CS-01Ｓ63551

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

脂蛋白酯酶是脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成的一種酶，可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯，以供組織氧化供能和貯存，并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。

商品介紹：

測(cè)定原理

脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。

試劑組成和配制

試劑一：液體60mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體25mL×1瓶，4℃保存。

樣品處理

1.組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清待測(cè)。

2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后于4℃，10000g離心10min，取上清待測(cè)。

3.血清：直接測(cè)定。

測(cè)定操作

計(jì)算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每毫克蛋白每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個(gè)酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V反總÷（V樣×Cpr）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每克組織每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個(gè)酶活力單位。

LPL活性（μmol /min /g 鮮重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷W

3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個(gè)酶活力單位。

LPL活性（μmol /min /104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷細(xì)胞數(shù)量

4．按照液體體積計(jì)算

酶活性定義：在45℃，pH7.5條件下，每毫升血清每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個(gè)酶活力單位。

LPL活性（μmol /min /mL）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷V樣÷T

= 17.21×（△A+0.0169）

V反總：反應(yīng)總體積，1mL；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.1mL；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，10min

注意事項(xiàng)

1.試劑三加入混勻后靜置兩分鐘立即測(cè)定，否則影響吸光值。

2.吸光值過(guò)高或者測(cè)定結(jié)果不穩(wěn)定，則將酶液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?，并在?jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

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