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本試劑盒適于一抗來源為小鼠的IgG類抗體，是專為免疫組化和其他免疫檢測而設(shè)計(jì)的。鏈霉親和素同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍，兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。此免疫組化雙顯色試劑盒采用熒光素 DyLight 488 與過氧化物酶(POD)標(biāo)記的鏈酶親和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一種近年來被廣泛應(yīng)用的新型熒光染料，具有很好的光譜寬度、更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，更高的抗淬滅性和特異性，對 pH 不敏感、分子較小滲透性好等優(yōu)勢。DyLight 488 最大吸收峰 493nm；最大發(fā)射峰 518nm。呈黃綠色。加入顯色劑 DAB 顯色后，染色呈棕黃色。用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可在同一張切片上用兩套顯示系統(tǒng)觀察。

保存條件：4℃可保存一年，應(yīng)避免冷凍。

石蠟片染色步驟：

1. 石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。

2. 3%H2O2去離子水室溫孵育5-10分鐘,以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性.PBS沖洗，5分鐘×3次。

3. 根據(jù)需要選擇抗原修復(fù)方式及強(qiáng)度。可熱修復(fù)、酶修復(fù)或不修復(fù)。

4. 封閉。滴加用稀釋后的正常山羊血清封閉液(稀釋比 1:10)，37℃孵育30分鐘，甩干，勿洗。

5. 滴加一抗(小鼠IgG)，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。PBS沖洗，5分鐘×3次。

6. 滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，37℃孵育30分鐘。PBS沖洗，5分鐘×3次。

7. 滴加SABC-DyLight 488(參考效價(jià)1:200-800)或SABC-POD(參考效價(jià)1:100)，37℃孵育30分鐘。PBS沖洗，5分鐘×3次。

8. 顯色液顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。顯色劑可選DAB(ZN1968)。自來水充分沖洗。

9. 根據(jù)需要進(jìn)行蘇木素(ZN1971)復(fù)染，染色時(shí)間為0.5-2分鐘。選用中性樹膠，水溶性封片劑(ZN2946)或抗熒光衰減封片劑(ZN1974)封片。

10. 結(jié)果觀察。熒光顯微鏡下有黃綠色顆粒者為陽性染色。普通光學(xué)顯微鏡下有棕黃色顆粒者為陽性染色。

雙顯色免疫組化試劑盒(小鼠源IgG型一抗)(DyLight488和POD)細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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