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SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)

  • 產品貨號：CS-C8800
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:盒
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  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)價格優惠、質量保證、歡迎咨詢訂購！

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標簽:SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)圖片 SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)價格 

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中文名稱：SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)
英文名稱：
產品規格：10ml
發貨周期：1～3天
產品保存：-20℃保存，一年有效
產品說明：SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer，1×)，是一種經過改良的以溴酚藍為染料的蛋白上樣緩沖液。可以直接用于細胞或組織樣品的裂解，并用于后續常規的SDS-PAGE 蛋白樣品的上樣。使用 SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)直接裂解蛋白樣品的優點是比較便捷；缺點是裂解好的蛋白樣品不能用常規的Bradford 法或BCA 法測定蛋白濃度。這樣蛋白上樣量的均一性就較難控制，需要借助考馬斯亮藍等的染色結果或
Western的檢測結果，來調整上樣量。當細胞量或組織用量能控制得比較均一時，使用本裂解液直接裂解獲取蛋白樣品會比較便捷。
本產品也可以用于 SDS-PAGE 時待上樣蛋白樣品的稀釋等。
注意事項：
1．SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)中含少量 DTT，有輕微刺激性氣味，但不含劇毒的巰基乙醇。
2.SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)必須完全溶解后再使用。
使用說明：
1.在室溫或不超過 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上樣緩沖液(1×)。水浴溶解后立即室溫存放，盡量避免長時間 置于水浴中。
2.對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升 SDS-PAGE 上樣緩沖液(1×)的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使 SDS-PAGE 上樣緩沖液(1×)和細胞充分接觸。通常 SDS-PAGE 上樣緩沖液
(1×)接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。裂解后的樣品收集到一潔凈離心管內。
3.對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升SDS-PAGE上樣緩沖液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 上樣緩沖液(1×)。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再進行裂解。
4.對于組織樣品：
A.把組織剪切成細小的碎片。
B.按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升 SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)。(如果裂解不充分可以適當添加更多的SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少 SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(1×)的用量。)
C.用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
D.充分裂解后，將樣品收集到一潔凈離心管內。
說明：如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。直接裂解的優點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
5.100℃或沸水浴加熱 5-10分鐘，以充分變性蛋白。說明：煮沸前通常會發現蛋白樣品內有粘稠的半透明狀物體，通常在本上樣緩沖液內沸水浴煮沸 8-10分鐘后可以確保該粘稠的半透明狀物體消失，以便于后續的上樣操作。
注意：如果起始時細胞或組織的用量較大，基因組 DNA 含量較高，煮沸 5-10分鐘后有可能仍然比較粘稠或者有粘稠狀的半透明物體。此時需要再煮沸 5-10分鐘或者加入適量 1×的蛋白上樣緩沖液后再煮沸 3-5分鐘。充分煮沸后一方面可以使結合在基因組 DNA 上的蛋白充分釋放，同時會導致基因組 DNA的部分斷裂從而使粘稠感消失，這樣就不會影響后續的上樣操作了。
6.冷卻到室溫后，室溫稍離心一下以沉淀可能出現的雜質等，上清即可直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內即可。通常電泳至藍色染料到達膠的底端處附近即可停止電泳。
 
 
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)細胞生物學研究有以下幾個方面。
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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