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本探針是最常用的細胞膜熒光探針之一，呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料，進入細胞膜后可以側(cè)向擴散逐漸使整個細胞的細胞膜被染色。DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱，僅當進入到細胞膜后才可以被激發(fā)出很強的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光，DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中，最大激發(fā)波長為484nm，最大發(fā)射波長為501nm。

CAS：34215-57-1

分子式：C53H85ClN2O6

分子量：881.72

DiO可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF，溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱，并用超聲處理以促進溶解。

DiO被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiO通常不會明顯影響細胞的生存力(viability)。DiO對于細胞膜染色的熒光強度通常要低于DiI，有時對于某些經(jīng)過固定的組織的染色效果欠佳。

DiO除了最簡單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

用于細胞膜熒光標記時，DiO的常用濃度為1-30μM，最常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細胞或組織，染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定，使用其它不適當?shù)墓潭ㄒ簳䦟е聼晒獗尘拜^高。

注意事項：熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

儲存條件：4℃避光，有效期一年。

細胞膜綠色熒光探針(DiO)細胞生物學研究有以下幾個方面。

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術有限公司

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