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吖啶橙能透過胞膜完整的細(xì)胞，嵌入細(xì)胞核DNA，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細(xì)胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細(xì)胞形態(tài)：活細(xì)胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu)；早期凋亡細(xì)胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細(xì)胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細(xì)胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB 溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩(wěn)定劑不影響實驗效果。

使用方法：（僅供參考）

1、使用前先根據(jù)用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.1、對于貼壁細(xì)胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用 PBS 洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞，加入新的 PBS；如果需要觀察全部細(xì)胞特性，保留未貼壁細(xì)胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。

2.2、對于懸浮細(xì)胞，可直接加入工作液或離心收集細(xì)胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，離心去除工作液，后用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。

3、建議用藍(lán)光激發(fā)，視野下可以觀察到死細(xì)胞呈現(xiàn)紅色，活細(xì)胞呈現(xiàn)綠色。

注意事項：

1、含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。

2、染色液工作濃度和染色時間可根據(jù)具體實驗情況適當(dāng)調(diào)整，以期達(dá)到最佳效果。

保存：4℃避光密封保存，有效期一年。

AO-EB雙染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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