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Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒

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  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:盒
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  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容:Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒現貨供應,公司產品僅用于科研。

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標簽:Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒圖片 Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒價格 

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中文名稱:Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產品規格:20T
發貨周期:1~3天
Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒是用紅色熒光染料PE(Phycoerythrin)標記的Annexin V作為探針,來檢測細胞早期凋亡的發生,可用熒光顯微鏡、流式細胞儀或其他熒光檢測設備進行檢測。
其檢測原理為:在正常的活細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細胞膜的內側,但在早期凋亡的細胞中,PS 從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中。Annexin-Ⅴ(膜聯蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白,能與PS高親和力結合。可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。
另外,本試劑盒中提供的7-AAD可用來區分存活的早期細胞和壞死或晚期凋亡細胞。7-AAD是一種核酸染料,同PI有著相似的熒光特性,但其發射光譜較PI窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI的最佳替代品,可與Annexin V聯合使用。該染料不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜,但可穿透晚期凋亡細胞或者壞死細胞并與其內的DNA結合。因此將Annexin V-PE與7-AAD聯合使用時,7-AAD則被排除在活細胞(Annexin V-/7-AAD-)和早期凋亡細胞(Annexin V+/7-AAD-)之外,而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被Annexin V-PE和7-AAD結合染色呈現雙陽性(Annexin V+/7-AAD+)。
試劑盒組份:
重組人Annexin V/PE(rh Annexin V/PE)—————100µl
7-AAD Viability Staining Solution(20µg/ml)——200µl
4×Binding Buffer————————————————4ml
注意事項
1) 試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
2) 由于細胞凋亡是一個快速的過程,建議樣品在染色后1小時之內進行分析。
3) 對于貼壁細胞,消化是一個關鍵步驟。貼壁細胞誘導細胞凋亡時如有漂浮細胞,需收集漂浮細胞和貼壁細胞后合并染色。處理貼壁細胞時要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。胰酶消化時間過短,細胞需要用力吹打才能脫落,容易造成細胞膜的損傷,7-AAD攝入過多;消化時間過長,細胞膜同樣易造成損傷,甚至會影響細胞膜上磷脂酰絲氨酸與Annexin V-PE的結合。消化時將胰酶鋪滿孔板底后,輕搖時胰酶與細胞充分接觸,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段時間,待細胞間空隙增大,瓶底呈花斑狀即可終止。在消化液中盡量不用EDTA,EDTA會影響Annexin V與PS的結合。
4) 如果樣品來源于血液,請務必除去血液中的血小板。因為血小板含有PS,能與Annexin V結合,從而干擾實驗結果。可以使用含有EDTA的緩沖劑并低速離心(200×g)洗去血小板,然后用Annexin V結合緩沖液清洗細胞,以避免殘留的EDTA會螯合Ca2+。
5) 7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
6) Annexin V-PE和7-AAD是光敏物質,在操作時請注意避光。
儲存條件:4℃,有效期一年。
Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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