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Ki67細胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)

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簡介內容:Ki67細胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)價格優惠、質量保證、歡迎咨詢訂購!

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中文名稱:Ki67細胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)
英文名稱:Ki67 cell proliferation Detection Kit
產品規格:20T
發貨周期:1~3天
Ki67 蛋白是細胞周期相關的一種核蛋白,主要表達于細胞增殖分裂的各個時期(G1、S、G2 和M 期),但是在靜息的細胞(G0 期)中不表達。Ki67 常用于檢測腫瘤細胞的生長指數(免疫組化法利用計算細胞總數中的Ki67 陽性細胞數所占比例得到Ki67 指數)。
Ki67 通常通過標記抗Ki67 的抗體(FITC 綠色熒光)和DNA 染料碘化丙啶(PI,紅色)而利用流式細胞儀檢測來實現對細胞周期的檢測。
操作方法
1. 在最適的環境下培養細胞。
2. 除去培養液,用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶處理和收集細胞,離心,(注意1)保證每管細胞數在106 個。
4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。(注意2)
5. 沉淀細胞,完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細胞2 次。
7. 用100μl 抗體孵育液(0.5% Tween-20/1%BSA/PBS)重懸細胞,加入1ul Ki67 抗體(1μg/106 cells),室溫孵育1 小時。
8. 離心收集細胞,用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 離心收集細胞,用50μl 抗體孵育液重懸,加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC,室溫孵育30 分鐘。離心收集細胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS(pH7.4)重懸細胞。
11. 避光使細胞在室溫下孵育20min 后,離心收集細胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后,轉移至流式檢測管中重懸。
12. FACS 檢測或者儲存于4℃。
Ki67細胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)細胞生物學研究有以下幾個方面。
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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