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Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒

  • 產品貨號：CS-C6047
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:盒
  • 采購熱度：628
  • 庫存：100
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  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒價格優惠、質量保證、歡迎咨詢訂購！

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標簽:Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒圖片 Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒價格 

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中文名稱：Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
產品規格：50次
發貨周期：1～3天
本試劑盒是一種采用Annexin V-FITC與PI雙染法進行細胞早期凋亡分析的檢測試劑盒。
  細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面，這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外，使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂，正常主要存在于細胞膜的內面，在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。Annexin V具有易于結合到磷脂類如PS的特性，對PS有高度的親和性。因此，該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面的PS。PS轉移到細胞膜外不是凋亡所獨特的，也可發生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的，而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細胞非透過性熒光染料碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)不能通過完整的活細胞，但能夠對壞死和凋亡晚期的細胞進行染色， 因此通常將Annexin V與PI配合染色， 以區別凋亡早期細胞與壞死細胞和凋亡的晚期細胞。
注意事項：
1、本試劑盒需使用流式細胞儀進行檢測。
2、需自備PBS和去離子水。
3、熒光染料均存在淬滅問題，保存和使用過程中請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
4、PI對人體有刺激性，請注意適當防護。
5、請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟：
1、細胞樣品的準備：
a．對于貼壁細胞：小心收集細胞培養液到一離心管內備用。用胰酶消化細胞，至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細胞培養液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。再次收集到離心管內。1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的培養液，以避免吸走細胞。加入約1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞。
b．對于懸浮細胞：1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養液，以避免吸走細胞。加入約1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，并轉移到1.5毫升離心管內。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的PBS，以避免吸走細胞。再次加入1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞。
2、用去離子水按 1:3 稀釋Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去離子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新懸浮細胞，調節其濃度為 1×106/ml。
4、取 100μl 的細胞懸液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V/FITC 和 10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘。
6、在反應管中加 400μl PBS，流式細胞儀(FACS)分析。
儲存條件：2～8℃，避光保存

Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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