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本試劑盒是基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細胞增殖檢測和細胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細胞增殖檢測方法。基于CFDA SE熒光標記的細胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標記獲得的檢測結果完全一致，但同時可以提供更多的細胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細胞群中有多少比例的細胞分裂了1次、2次或更多次數，同時如果和其它熒光探針聯用，可以獲取不同分裂次數細胞的其它相關信息。
CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式為C29H19NO11，分子量為557.47，CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細胞膜，進入細胞后可以被細胞內的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶發性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內蛋白的Lysine殘基或其它氨基發生結合反應，并標記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時，即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩定，穩定標記的時間可達數個月。CFDA SE標記細胞的熒光非常均一，比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩定，每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞，分裂一次的細胞(1/2的熒光強度)，分離兩次的細胞(1/4的熒光強度)，分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數的細胞。采用CFDA SE通過流式細胞儀檢測獲得的檢測結果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數的細胞，從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數的細胞。分裂次數較多后，分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數較少的細胞會逐漸減少直至檢測不到。
使用CFDA SE可以檢測分裂多達8次或更多次數的細胞增殖。目前CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測，甚至還可以用于細菌增殖的檢測。
CFDA SE標記細胞呈綠色熒光，檢測時的激發波長可以選擇488nm，此時的發射波長為518nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標記的細胞也可以用熒光顯微鏡進行觀察。CFDA SE標記的細胞無論在體外還是體內都不會使鄰近細胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標記后不會從一個細胞轉移到鄰近細胞。CFDA SE標記細胞僅需5-15分鐘即可完成。對于不同細胞，最佳標記時間需自行摸索。
本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進行細胞標記時所需的配套試劑。如果每個檢測樣品的熒光探針標記體積為1ml，本試劑盒共可以檢測2000個樣品。
試劑盒組份：
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶劑————————————1ml/管，共兩管
CFDA SE細胞標記液(10X) ——————100ml/瓶，共兩瓶
注意事項：
1. CFDA SE配制成儲存液后宜在一個月內使用完畢，最長不宜超過2個月。CFDA SE易被水解，在水溶液中會很快變質。請在使用過程中避免接觸水。在標記細胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內的。
2. CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
儲存條件：-20℃，有效期6個月。

CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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