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Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也稱CPP32、Yama或apopain，有時被寫作caspase-3或caspase 3，屬于caspase家族的CED-3亞家族(CED-3 subfamily)，是細胞凋亡過程中的一個關鍵酶。Caspase 3是哺乳動物細胞中研究最多的一個caspase。Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9，并可以直接特異性剪切許多caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)，ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)，gelsolin和fodrin等。這些由caspase 3介導的蛋白剪切是細胞凋亡分子機制的重要組成部分。另外，caspase 3在細胞核凋亡過程中也起到了關鍵作用，包括染色質(zhì)固縮(chromatin condensention)，DNA片段化(DNA fragmentation)等。同時caspase 3對細胞起泡(cell blebbing)也起到關鍵作用。

本Caspase 3 活性檢測試劑盒是基于caspase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 3的活性。pNA在405nm附近有強吸收。

試劑盒中提供了caspase 3催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA，可以作為定量caspase 3酶活性的標準品。

試劑盒組分：

裂解液——————8ml

檢測緩沖液——————8ml

Ac-DEVD-pNA(2mM)———200μl

pNA(10mM)——————200μl

注意事項：

1. 須自備可以測定A405或A400的酶標儀或容量不超過100μl的分光光度檢測杯及相應分光光度計。優(yōu)先考慮測定A405，如有困難可以測定A400。

2. Ac-DEVD-pNA需盡量避免反復凍融，請注意適當分裝。

3. 測定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測定試劑盒(YT034)，可向百奧萊博訂購。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測定蛋白濃度，以降低DTT對蛋白濃度測定的干擾。

4. pNA(中文名為4-硝基苯胺)有毒，請注意小心防護。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

5. 本試劑盒的裂解液可以和百奧萊博的其它caspase活性檢測試劑盒的裂解液通用，即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于百奧萊博其它caspase活性檢測試劑盒的檢測。

儲存條件：-20℃。

Caspase 3 活性檢測試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術有限公司

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