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本試劑盒是采用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞或組織裂解液中caspase 1酶活性或純化的caspase 1酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測(cè)或容量不超過(guò)100μl的分光光度檢測(cè)杯檢測(cè)時(shí)，除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測(cè)20個(gè)樣品。

試劑盒組分：

裂解液——————8ml

檢測(cè)緩沖液——————8ml

Ac-YVAD-pNA(2mM)———200μl

pNA(10mM)——————200μl

Caspase是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也稱interkeukin 1b conberting enzyme(ICE)，有時(shí)被寫作caspase-1或caspase 1，是caspase家族中唯一可以剪切IL-1b前體蛋白或IL-18前體產(chǎn)生相應(yīng)成熟的細(xì)胞因子的caspase。Caspase 11可以剪切45kD的caspase 1前體蛋白，產(chǎn)生20kD和10kD的片段，這兩個(gè)片段可以形成異源二聚體(heterodimer)，并進(jìn)一步由兩個(gè)異源二聚體形成四聚體。Caspase 1可以通過(guò)剪切其凋亡Bcl-XL來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，并通過(guò)其對(duì)一些細(xì)胞因子前體的剪切來(lái)調(diào)控相關(guān)免疫反應(yīng)。

本caspase 1活性檢測(cè)試劑盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)檢測(cè)caspase 1的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。

試劑盒中提供了caspase 1催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA，可以作為定量caspase 1酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。

注意事項(xiàng)：

1. 須自備可以測(cè)定A405或A400的酶標(biāo)儀或容量不超過(guò)100μl的分光光度檢測(cè)杯及相應(yīng)分光光度計(jì)。優(yōu)先考慮測(cè)定A405，如有困難可以測(cè)定A400。

2. Ac-YVAD-pNA需盡量避免反復(fù)凍融，請(qǐng)注意適當(dāng)分裝。

3. 測(cè)定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(YT034)，可向百奧萊博訂購(gòu)。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測(cè)定蛋白濃度，以降低DTT對(duì)蛋白濃度測(cè)定的干擾。

4. pNA(中文名為4-硝基苯胺)有毒，請(qǐng)注意小心防護(hù)。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

5. 本試劑盒的裂解液可以和百奧萊博的其它c(diǎn)aspase活性檢測(cè)試劑盒的裂解液通用，即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于百奧萊博其它c(diǎn)aspase活性檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)。

儲(chǔ)存條件：-20℃。

Caspase 1 活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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