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公司新聞

探針是由目的基因的已知的信息決定的,有三種可能性

閱讀:692     發布時間:2020/4/22 15:54:37

      每一個細胞都含有相同的基因,但不同細胞中有的基因是表達的, 而有的基因關閉。只有少量基因在所有的細胞類型中都表達,利用mRNA構建的基因文庫,只含有表達的部分基因。例如麩朊(醇溶朊),小麥中的一種營養蛋白,在正發育的種子中,以非常高的水平表達,大約占總mRNA的30%。
探針是由目的基因的已知的信息決定的,有三種可能性:
1) 目的基因在特定細胞中的豐度

2) 基因所編碼的蛋白質或者部分序列

3) 基因是一個基因家族中的一個


利用同源探針篩選目的克隆

任意的兩條單鏈核酸分子都有可能通過堿基配對結合,大部分的配對分子是不穩定的,因為只有少量的堿基配對。然而如果兩條鏈是互補的,大部分堿基可以配對形成穩定的分子。不僅DNA間可以配對,DNA 與RNA間也可以進行配對。因此可以使用同源探針篩選目的克隆。

如果克隆的基因所編碼的蛋白已知。就可以利用遺傳密碼子預測相關基因的核苷酸序列,只有蛋氨酸和色氨酸無兼并密碼,其他的氨基酸至少有兩種密碼子。例如丙氨酸有四種密碼子,前兩位是相同的,GCA,GCT,GCC,GCG,只能正確的預測兩位的堿基。

例如細胞色素C,從59號氨基酸的一段序列:Trp-Asp-Glu-Asn-Asn-Met,相應的DNA序列是TGG-GA(T/C)-GA(A/G)-AA(T/C)-AA(T/C)-ATG,在18個堿基中有14個是可以預測的。如果用來雜交的18核苷酸的序列有上千種可能的排列,很顯然不適合于合成探針。
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