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細(xì)胞毒性技術(shù)保護(hù)點(diǎn)

閱讀：672     發(fā)布時間：2020/3/24 14:22:13

        細(xì)胞毒性是指由化學(xué)物質(zhì)引起的細(xì)胞殺傷事件，不依賴于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機(jī)理。化學(xué)物質(zhì)的細(xì)胞毒性測試，對人類健康風(fēng)險評估、藥物篩選、食品添加劑的安全測試，以及農(nóng)藥的毒性檢定都具有重要的意義。目前，有很多技術(shù)可以實現(xiàn)化合物的細(xì)胞毒性測定，如:MTT、XTT法(利用線粒體內(nèi)部酶的活性，可以將特定的四唑鹽類進(jìn)行轉(zhuǎn)化，然后通過酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測)，LDH方法(通過檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性，來檢測細(xì)胞毒性)。盡管這些方法可以實現(xiàn)細(xì)胞毒性測定，但存在諸多弊端，(I)大部分方法的測定程序繁瑣，無法實現(xiàn)高通量篩選(High Throughput Screening,HTS)； (2)中性紅染料染...


技術(shù)保護(hù)點(diǎn)
一種高通量細(xì)胞毒性評估方法，所用的系統(tǒng)包括用于監(jiān)測細(xì)胞生長和控制其生長環(huán)境參數(shù)的PC機(jī)或筆記本電腦、用于維持細(xì)胞生長環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)箱、高通量的384x微電極板、靶細(xì)胞、待測化合物和阻抗信號傳遞電纜，PC機(jī)或筆記本電腦安裝有ACEA公司開發(fā)的實時細(xì)胞監(jiān)控軟件，實時細(xì)胞監(jiān)控軟件通過電纜獲取阻抗信號變化，并將這種阻抗信號變化轉(zhuǎn)化成細(xì)胞指數(shù)顯示在系統(tǒng)中，384x微電極板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，靶細(xì)胞接種在384x微電極板中，其特征在于，該方法首先將靶細(xì)胞暴露在具有不同濃度的待測化合物中，并利用實時細(xì)胞監(jiān)控軟件記錄整個靶細(xì)胞暴露過程的響應(yīng)曲線；然后根據(jù)響應(yīng)曲線所體現(xiàn)的細(xì)胞數(shù)量的變化，計算細(xì)胞毒性指標(biāo)，該指標(biāo)為靶細(xì)胞在整個指數(shù)增長期的數(shù)量變化，即靶細(xì)胞響應(yīng)面積，且采用多濃度測試方法，得到基于靶細(xì)胞響應(yīng)面積的“濃度‑響應(yīng)曲線”；最后，在“濃度‑響應(yīng)曲線”所反映的待測化合物細(xì)胞毒性隨濃度變化規(guī)律的基礎(chǔ)上，計算得到新的細(xì)胞毒性指標(biāo)。 
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