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糖原磷酸化酶a(GPa)試劑盒注意事項

閱讀:628     發布時間:2020/2/19 17:00:00

 糖原磷酸化酶a(GPa)試劑盒注意事項:
測定意義:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進行。

測定原理:
未添加激活劑時,GPa催化糖原和無機磷產生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。
 
一般從以下幾個方面來考慮:
①選擇適當的測量波長。一般根據待測組分的吸收光譜選擇zui大吸收波長作為測量波長。如果干擾組分在zui大吸收波長也有吸收,則應根據:吸收大,干擾小”的原則來選擇測量波長
②調價溶液的濃度,或選用不同厚度的吸收池,控制被測是呀的吸光度在0.2-0.8范圍內。
③選擇適當的參比溶液。
在分析復雜樣品時,如何消除干擾?
消除干擾方法主要有:
1、加入眼筆記,如加入配位掩蔽劑,使其與干擾離子生成測定波長物吸收的配合物,如加入氧化還原掩蔽劑,改變干擾離子的價態。
2、選擇適宜的顯色條件,如控制溶液的酸度等,使干擾離子與顯色劑不發生反應。3、采用雙波長或其他選擇性的方法;
4、分離干擾離子。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
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