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大鼠試劑盒11脫氫血栓素B2 elisa Kitsa實驗原理

閱讀:303     發布時間:2023/11/20 16:27:35

     大鼠試劑盒 11脫氫血栓素B2 elisa Kit是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被11脫氫血栓素B2捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的細11脫氫血栓素B2呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
 
 
 
ELIS試劑盒檢測過程中的注意事項:
 
 
液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
 
 
洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。底物是光敏感的,要在臨用前現配。檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。待檢樣品要澄清,否則會影響結果。溫浴時間應遵守試劑盒規定。應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性。對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
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