制川烏LAMP鑒定試劑盒使用方法:一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照《食品衛生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經過增菌后,收集培養物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業化產品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
1、液體培養物:取液體培養物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注:陽性對照和陰性對照為已經抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區域加入陽性對照。
Adiponectin receptor 2脂聯素受體2抗體
ANGEL1ANGEL1蛋白抗體
ANGEL2ANGEL2蛋白抗體
ANKLE2ANKLE2蛋白抗體
ANKMY1睪丸特異性錨樣蛋白1抗體
ANKRD13B錨蛋白重復結構域蛋白13B抗體
ANKRD20A1錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體
ANKRD20A3錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體
ANKRD22錨蛋白重復結構域蛋白22抗體
ANKRD50錨蛋白重復結構域蛋白50抗體
ATP6V1G2氫離子轉運ATP合成酶6G抗體
ANKRD26錨蛋白重復結構域蛋白26抗體
ANKRD26錨蛋白重復結構域蛋白26抗體
ACY3丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體
ARSK芳香基硫酸酯酶K抗體
Amphiphysin神經元突觸前膜蛋白抗體
Ankyrin G錨定蛋白G抗體
Actin肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
ADAMTS1整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體
ADAMTS7整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體
ADAMTS7整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體
beta Adducin內收蛋白抗體
ADFP脂肪組織分化相關蛋白抗體
Adiponectin Receptor 1脂聯素受體1抗體
ADM R腎上腺髓質素受體抗體