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公司新聞

大豆源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法反應五要素

閱讀:448     發布時間:2022/8/15 16:47:26

 大豆源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體ADAMTS12
α-輔肌動蛋白4(內參)抗體alpha Actinin 4-Loading Control
堿性磷酸酶抗體Alkaline Phosphatase
AU1 tag標簽抗體AU1 tag
脂肪細胞增強結合蛋白1AEBP1
蛋白激酶BAKT1
蛋白激酶BAKT1
血管生成素樣蛋白2抗體ANGL2
血管生成素3/血管生成素4抗體Angiopoietin 4
膜粘連蛋白 I抗體Annexin I
膜粘連蛋白 Ⅱ抗體Annexin A2
活化轉錄因子1抗體ATF1
水通道蛋白4抗體Aquaporin 4 
活化復制因子2抗體ATF2
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體AMPK beta 1
糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽抗體Amylin
血管緊張素Ⅱ抗體Angiotensin II
血管緊張素Ⅱ受體1抗體AT2R
血管生成素-1抗體Angiopoietin-1
膜粘連蛋白5抗體Annexin V
重組膜粘連蛋白5抗體Annexin V
銜接蛋白α-Adaptin抗體alpha Adaptin
 
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