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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-589對于懸浮細(xì)胞，傳代

閱讀：502     發(fā)布時間：2022/7/20 11:59:04

 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-589對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
蘋果酸脫氫酶（MDH）試劑盒
NADH-CoQ還原酶測試盒          
NADH氧化酶（NOX）測試盒  
檸檬酸合酶（CS）試劑盒
檸檬酸合酶（CS）試劑盒
檸檬酸合酶（CS）試劑盒
輔酶ⅡNADP（H）含量試劑盒
輔酶ⅡNADP（H）含量試劑盒
NAD激酶（NADK）試劑盒
NADP磷酸酶（NADPase）測試盒
6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）試劑盒
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）試劑盒
蘋果酸酶（ME）試劑盒
6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）試劑盒
還原型谷胱甘肽（GSH）試劑盒
總谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽（T-GSH/GSSG）含量測定試劑盒
谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）試劑盒
谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）試劑盒
硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）試劑盒
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GST）試劑盒
谷胱甘肽還原酶（GR）試劑盒
硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）試劑盒
γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）試劑盒
 
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