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腦視網膜血管瘤G7蛋白抗體 常用免疫組織化學方法的原理

閱讀:650     發布時間:2020/7/30 15:40:29

腦視網膜血管瘤G7蛋白抗體常用免疫組織化學方法的原理:
1. 免疫熒光細胞化學技術:將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量。
2. 免疫酶細胞化學技術:是目前免疫組織化學研究中最常用的技術.腦視網膜血管瘤G7蛋白抗體基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞或組織內的相應抗原進行定位或定性研究。
3. 免疫膠體金技術:就是用膠體金標記一抗,二抗或其他的能特異性的結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對組織或細胞內的抗原進行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究。
 高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,腦視網膜血管瘤G7蛋白抗體因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來,以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性,定位或定量的研究。
腦視網膜血管瘤G7蛋白抗體實驗檢測操作方法 :
1. 每個樣品取2支流式檢測管,分別注明同型對照和待測,兩管分別加入106-7/100μl個待側細胞(若細胞濃度低或加入的細胞懸液較多,可1200轉/每分鐘,10分鐘低溫離心,棄上清,保證100μl被檢樣品) 
2. 同型對照管中加入熒光標記同型對照抗體,做陰性對照;待測管中加入熒光標記的一抗,做為實驗管,各加3μl (按抗體使用說明書,一抗可做選擇幾個梯度1:20、50、100倍稀釋)混勻即可。 
3. 上機檢測,先做同型對照,調整電壓至陰性區范圍,再測實驗管即可。
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