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公司新聞

細胞培養基方案詳解

閱讀：683     發布時間：2020/7/8 14:20:41

   在保持細胞完整性的同時快速從基質中移除各種細胞系的一般程序。這個過程并不意味著對所有細胞系都適用。個別系統的最佳條件和濃度應根據經驗確定。傳代培養時應定期監測細胞活力。細胞活力應大于90%。
 

取出并丟棄廢細胞培養基。
 
用不含鈣和鎂的平衡鹽溶液清洗細胞，或用EDTA清洗。將洗滌液加入燒瓶與試管相對的一側。搖動燒瓶1至2分鐘，沖洗細胞板，并丟棄洗滌液。
 
將2-3 ml/25 cm2的所選解離溶液添加到與細胞相對的燒瓶側。確保解離溶液覆蓋在細胞膜上。在37°C下培養燒瓶。輕輕搖動燒瓶。一般情況下，細胞在5-15分鐘內被解離，實際需要的時間會因細胞系的不同而有所不同。仔細監控過程以避免細胞損傷。除了輕輕搖動外，還可以敲打瓶狀細胞系，這些細胞系的特征是很難從基質中移除，以加速去除。
 
當電池完全分離后，將燒瓶豎直放置，使電池排至燒瓶底部。向燒瓶中加入完整的培養基。用移液管在單層膜表面反復分散細胞。計數細胞并傳代培養。
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